瞬態轉染和穩定轉染有什么區別
瞬態轉染和穩定轉染之間的主要區別在于,在瞬時轉染中,外源基因不整合到基因組中,而在穩定轉染中,外源基因整合到基因組中。 此外,基因表達在瞬時轉染中發生的時間很短,而基因表達在穩定轉染中發生較長的時間,因為外源基因經過幾代。
瞬時和穩定轉染是將外來遺傳元件轉染成真核細胞的兩種方法。一般來說,這兩種類型的轉染在生物技術中都有重要的應用。
什么是瞬時轉染
瞬時轉染是一種轉染,其中外源基因進入細胞但不整合到基因組中。因此,外來基因不會在真核細胞內進行復制。因此,它會隨著時間的推移而降解,同時通過細胞分裂稀釋。瞬態轉導的主要特征是它只允許短期基因表達。
圖1:GFP融合蛋白瞬時轉染到S2細胞中
此外,一般來說,用于轉染基因的載體也具有報告基因,可以監測真核細胞內外源基因的表達。此外,報告基因允許監測細胞內外源基因的存在。
什么是穩定轉染
穩定轉染是另一種類型的轉染,其中外源基因通過整合到染色體或染色體外表觀體中并入真核細胞的基因組。因此,穩定轉染的主要特征是它允許外源基因代代相傳。此外,由于整合到基因組中,外源基因在細胞系內持續更長的時間,從而產生“高而穩定的基因表達。
圖2:穩定轉染
此外,穩定轉染中的整合構建體包含可選擇的創客,以識別成功整合到基因組中的構建體以及基因表達水平。
瞬態轉染和穩定轉染的相似性
瞬時和穩定轉染是將外源基因引入真核細胞的兩種方法。 外源基因的表達發生在這兩種方法中。 此外,這些方法在生物技術中具有不同的應用。
GFP在煙草葉片的瞬時表達(LUYOR-3415RG激發光源照射下發出綠色熒光)
瞬態轉染和穩定轉染的區別
瞬時轉染是指不參與將外源DNA整合到真核細胞基因組中的轉染方法,而穩定轉染是指參與將外源DNA整合到真核細胞基因組中的轉染方法。 因此,這解釋了瞬時轉染和穩定轉染之間的主要區別。
檢測所需的時間:瞬時轉染檢測需要3-4周才能完成,而穩定的轉染需要12-18周才能完成。
遺傳變化:真核細胞中的瞬時轉染不會改變,而穩定的轉染會在真核細胞中產生性的遺傳變化。
傳給后代: 瞬時轉染不允許外源DNA代代傳遞,而穩定的轉染允許外源DNA代代相傳。
基因表達周期:瞬時轉染允許基因表達短時間長達24至96小時,而穩定的轉染允許基因表達更長的時間。
表達式級別:雖然瞬時轉染的表達水平相對較低,但穩定轉染具有高而穩定的表達。
成本:瞬態轉染和穩定轉染之間的另一個區別是瞬時轉染相對便宜,而穩定轉染昂貴。
應用
瞬時轉染對于短期基因表達研究(包括小規模蛋白質生產和基因敲低測定)非常重要,而穩定的轉染對于長期基因調控、大規模蛋白質生產、穩定細胞系的產生、基因治療等非常重要。
結論
簡而言之,瞬時轉染是一種外源基因不整合到真核細胞基因組中的轉染類型。因此,外來基因不會經過幾代細胞。此外,這種類型的轉染僅允許在短時間內表達外源基因。另一方面,穩定轉染是另一種類型的轉染,其中外源基因整合到真核細胞的基因組中。因此,外源基因會經過幾代細胞。此外,外源基因的表達發生在更長的時間內。因此,瞬時轉染和穩定轉染之間的主要區別在于將外源基因整合到真核細胞的基因組中。
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