LUYOR-3415RG熒光蛋白激發光源用于棉花功能基因篩選和視覺標記

近日，河南大學在《Front Plant Sci.》期刊發表文獻《Optimizing the Protein Fluorescence Reporting System for Somatic Embryogenesis Regeneration Screening and Visual Labeling of Functional Genes in Cotton》，文獻中指出利用LUYOR-3415熒光蛋白激發光源能夠棉花基因的篩選。下面是文獻摘要，文獻全文鏈接在網頁尾部。

蛋白質熒光報告系統對于深入的生命科學研究至關重要，為體內微觀生物活性的可視化提供了系統的標記工具，并徹底改變了基礎研究。棉花體細胞再生效率低，造成棉花轉化困難。有利于利用熒光報告系統篩選轉基因體細胞胚胎。然而，目前棉花中可用的熒光標記系統有限。為了優化棉花的熒光報告系統，擴大可用熒光蛋白的范圍，我們選擇了11種熒光蛋白，涵蓋紅色、綠色、黃色和青色熒光顏色，并用棉花表達。除mRuby2和G3GFP外，其他9種熒光蛋白（mCherry，tdTomato，sfGFP，Clover，EYFP，YPet，mVenus，mCerulean和ECFP）在轉基因愈傷組織和胚胎中穩定而強烈地表達，并在來自不同的棉花器官中遺傳自篩選的胚胎。此外，表達tdTomato的轉基因棉花在白光下呈粉紅色，不僅對愈傷組織、胚胎組織，而且對成熟植物的各種器官也呈粉紅色，為棉花遺傳轉化過程提供了視覺標記，加速了轉基因事件的評價。此外，我們在體內構建了表達mCherry標記的轉基因棉花細胞器標記物，覆蓋了七個特定的亞細胞區室：質膜，內質網，土著體，線粒體，質體，高爾基體和過氧化物酶體。我們還提供了一種簡單而高效的策略，使用細胞器標記物快速確定棉細胞中未表征蛋白質的亞細胞定位。zui后，我們建立了個使用氣孔特異性表達啟動子（ProKST1，ProGbSLSP和ProGC1）的棉花氣孔熒光報告系統來驅動三葉草表達。本研究中用于轉基因體細胞胚胎篩選和功能基因標記的優化熒光標記系統為加速體細胞再生效率和體內監測棉花中各種細胞過程提供了潛力。

LUYOR-3415RG激發光源用于熒光觀察

用變焦立體顯微鏡觀察轉基因棉花或煙草表皮細胞的胚胎愈傷組織，雄蕊，雌蕊，葉和種子組織中的熒光（奧林巴斯，東京，日本）。用共聚焦電子顯微鏡觀察轉基因棉花原生質體，氣孔細胞，纖維，葉表皮細胞和根部樣品中的熒光（尼康，東京，日本）。大于 2 厘米的轉基因樣品2使用LUYOR-3415RG手持熒光燈（中國上海LUYOR）進行觀察，并使用EOS 800D相機（佳能，中國北京）拍攝圖像，并帶有LUV-495A和LUV-590A熒光拍照濾鏡（LUYOR），用于綠色和紅色熒光觀察。使用濾光片。

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Published online 2022 Jan 7

文獻地址：https://doi.org/10.3389/fpls.2021.825212 

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